ELISA試劑盒的好壞會(huì)直接影響ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，有的時(shí)候ELISA試劑盒會(huì)出現(xiàn)變質(zhì)的情況，那么，是什么原因造成ELISA試劑盒變質(zhì)呢？今天我們就來(lái)介紹一下ELISA試劑盒變質(zhì)的原因。
1、方法學(xué)的影響
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法，其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響，結(jié)果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難控制。所以說(shuō)，各種實(shí)驗(yàn)方法在操作過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致ELISA試劑盒變質(zhì)。
2、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量一致，即使是通過(guò)批批檢驗(yàn)的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過(guò)程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性。對(duì)于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。
3、樣本因素
標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、等，后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。
4、操作因素
ELISA操作步驟復(fù)雜，操作不當(dāng)將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。這些步驟在操作過(guò)程中，操作不當(dāng)或者操作時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都有可能造成ELISA試劑盒的變質(zhì)。
5、常表示結(jié)果的常用方法
⑴.定性測(cè)定。
⑵.半定量測(cè)定 結(jié)果一般以滴度表示。
⑶.定量測(cè)定 即用已知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測(cè)定，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果以量或單位表示。在ELISA定量檢測(cè)中每一塊反應(yīng)板都必須繪制相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
ELISA實(shí)驗(yàn)過(guò)程復(fù)雜，影響因素較多，而ELISA試劑盒的有效性是ELISA實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行的前提，因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要細(xì)心操作，安全保存各種試劑，加大復(fù)查力度，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確。
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以上是介紹ELISA試劑盒變質(zhì)的原因有哪些？
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